卡梅德生物科技（天津）有限公司
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卡梅德生物（KMD Bioscience）多年来致力于蛋白表达、制备及其相关领域的研究，我们的科学家能够为您提供全方位的蛋白相关问题的解决方案。蛋白互作研究过程中，常需要找到蛋白或酶的配体，因此迫切需要一种高通量筛选方案，可以满足广大科研用户的需求。卡梅德生物提供的噬菌体展示平台是一种超高通量的配体筛选方式，通过该技术平台可以构建多达1013/ml个经过噬菌体展示的多肽或抗体克隆，平均可以做到独立克隆数为109-1010/ml，经过后续多轮淘筛可以提供多达105有效多肽或抗体的序列，为后续酶底物，蛋白配体和高特异性抗体搜寻提供坚实的研究基础。同时，配合卡梅德生物的亲和力筛选平台，可以在短时间内（2-3天）获得不同的多肽或抗体与靶点蛋白目标的亲和力排序，甚至精准亲和力的测定都可以完成（亲和力测定服务，详情请查看亲和力测定服务。基于噬菌体平台，卡梅德生物可以为客户构建随机7肽文库，12肽文库，15肽文库等，能够充分满足客户的不同需求。
卡梅德生物致力于为客户提供多肽文库构建的优质服务。
图1 肽库构建原理及流程（以抗体库展示为例）
图2 噬菌体展示系统的分类
M13噬菌体展示系统：
M13噬菌体中主要使用pIII和pVIII衣壳蛋白来构建其展示系统。pIII分布在噬菌体颗粒的一端，可在N端的柔性连接区插入分子量较大的外源多肽/蛋白，因此可用来展示分子量较大的蛋白；pVIII主要分布在噬菌体颗粒的两侧，分子量较小，拷贝数较多，所以只适用于展示外源短肽，目前主要应用于筛选低亲和力的配体。
T4噬菌体展示系统：
T4噬菌体常常用于研究不能被E. Coli分泌的复杂蛋白质，因为其病毒颗粒的组装是在宿主细胞内进行的，故而无需通过分泌途径就可以展示多种多肽或蛋白质。除此之外，T4噬菌体的衣壳蛋白上有两个结合位点，分别是SOC位点和HOC位点，因此该噬菌体具有能将两种不同性质的外源多肽/蛋白相融合并且同时展示在其表面的能力，展示的拷贝数也较多。
T7噬菌体展示系统：
T7噬菌体常用来构建噬菌体展示系统的衣壳蛋白是10B，与M13相比，其无需经过分泌，可直接使宿主菌进行裂解。因此可用于展示无法在M13系统展示的对分泌过程有抑制作用的多肽/蛋白，此外，T7噬菌体的生产十分迅速，可节省大量时间，便于研究。
图3 噬菌体展示肽库
卡梅德生物凭借丰富的经验以及完善的噬菌体展示技术平台，可以为客户提供多种不同长度，不同特性的肽库定制服务，以满足客户的需求。我们提供使用T7和M13噬菌体系统的定制肽库构建和筛选（卡梅德生物提供肽库或抗体库筛选服务）项目的特色服务。
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服务流程 |
服务项目 |
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核苷酸序列合成 |
随机合成客户指定长度的核苷酸序列 |
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聚合和酶切 |
合成的DNA序列进行聚合和酶切 |
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电转化文库制备 |
制备ER2738宿主菌，然后用构建良好的重组质粒转化大肠杆菌 |
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肽库容量和多样性检测 |
通过菌落计数检测抗体库容量，以及通过测序检测抗体库多样性 |
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噬菌体展示多肽文库制备 |
通过感染噬菌体包装肽库 |
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交付 |
冰袋邮寄 |
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服务流程 |
服务内容 |
服务周期 |
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抗原的质量控制 |
通过SDS-PAGE检测抗原纯度 |
1周 |
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抗体的筛选 |
通过3-4轮筛选，获得识别抗原的阳性克隆 |
2周 |
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抗体测序 |
阳性克隆测序 |
1周 |
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抗体的质量控制 |
在大肠杆菌中表达目标抗体，然后通过Elisa进行质量控制 |
1周 |
-- 卡梅德生物构建的定制多肽文库可高通量生产
-- 准确、快速的实验流程，为客户节省时间
-- 拥有专业的技术专家，精确控制筛选过程
-- 筛选大量不同克隆，无免疫原性问题
-- 特异性强、灵敏度高并且可以准确定位抗原决定簇
-- 可溶抗原的快速制备能力：结合公司现有的重组蛋白表达体系，能够在短时间内制备出高纯度、高生物学活性的可溶抗原蛋白，用以支持噬菌体抗体的免疫及筛选工作
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