转染方法

技术原理

应用

特点

磷酸钙法

磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜被细胞内吞

稳定转染

瞬时转染

不适用于原代细胞

操作简便但重复性差

电穿孔法

高脉冲电压破坏细胞膜电位，DNA通过膜上形成的小孔导入

稳定转染

瞬时转染

所有细胞

适用性广但细胞致死率高，DNA和细胞用量大

需根据不同细胞类型优化电穿孔实验条件

阳离子脂质体法

带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞

瞬时性转染所有细胞

适用性广，转染效率高，重复性好，但转染时需除血清。转染效果随细胞类型变化大

DEAE-右旋糖苷法

带正电的DEAE-右旋糖苷与核酸带负电的磷酸骨架相互作用形成复合物被细胞内吞

瞬时转染

相对简单，结果可重复，但对细胞有一定的毒副作用。转染时需除血清

病毒介导法

通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中

稳定转染

可用于难转染的细胞、原代细胞、体内细胞等。但携带基因不能太大，细胞需处于分裂期

基因枪法

将DNA用显微重金属颗粒沉淀，再用颗粒传递法将包被好的颗粒用弹道装置投射入细胞，DNA在胞内逐步释放，表达

瞬时转染

可用于人的表皮细胞，纤维原细胞，淋巴细胞以及原代细胞