2019-01-04 阅读(710)
Q1:如何测试免疫效果?
A1:免疫前和免疫后分别采集血清用ELISA检测其对免疫原的反应性。将免疫原包被在ELISA板上,然后连续稀释含有抗体的抗血清。我们还可以为客户的内部检测提供抗血清。
Q2: 在免疫期间会进行血液检测吗?
A2:是的,我们在免疫前和第二次或第三次注射后测试血液。通过间接ELISA法测定免疫血清来评估免疫应答。
Q3:免疫前的血清有什么作用?
A3:免疫前血清可作为进行各种实验的一个很好的阴性对照。
Q4:免疫需要多长时间?
A4: 一般来说,免疫需要2-3个月。确切的时间取决于宿主产生免疫反应的强度。
Q5: 应该选择哪种物种进行抗体制备?
A5:
物种 |
特点 |
小鼠 |
优点:
1. 成本低
2. 易于处理
3. 繁殖能力强
4. 能对多种抗原产生良好的免疫反应
缺点:
血清量少 |
大鼠 |
优点:
1. 多种抗体同种型:IgA,IgD,IgE,IgG和IgM抗体同种型
2. 诱导对小鼠抗原的免疫应答
3. 降低抗原需求
4. 免疫检测小鼠背景中的抗原无交叉反应
缺点:
血清量少 |
兔子 |
优点:
1. 能够识别啮齿动物和人类抗原之间的表位,这些表位对啮齿动物单克隆抗体是不可见的。
2. 成本低
3. 易于处理
缺点:
中等量血清 |
鸡 |
优点:
1. 由于亲缘距离的关系,大多数哺乳动物蛋白在鸡体内比在哺乳动物体内具有更强的免疫原性,因此产生更高亲合力的抗体。
2. 更高的特异性:与哺乳动物IgG相比,鸡IgY与除免疫原之外的哺乳动物蛋白具有更少的交叉反应性。
3. 低背景:IgY和IgG在Fc区域中的结构不同; IgY不与IgG Fc受体结合,从而产生较少的假阳性染色。
4. 高产量:需要少量的抗原就能在蛋黄中获得高且持久的IgY效价; 鸡定期产卵,可提供持续的IgY抗体来源。
缺点:
少数抗体同种型 |
山羊 |
优点:
1. 拥有大量抗血清,是小动物个体抗血清的7-8倍
2. 适合大规模生产
3. 高度的稳定性
缺点:
1. 成本高
2. 免疫周期长 |
豚鼠 |
优点:
1. 更敏感
2. 对某些与人类、小鼠和大鼠高度同源的抗原能够产生更强的抗体应答。
3. 为某些特定目标提供新型解决方案
缺点:
1. 成本高
2. 免疫周期长 |
骆驼 |
优点:
1. 仅用重链产生新抗体
2. 高物理化学稳定性
3. 易于制作多价形式
4. 快速组织渗透,快速清除
5. 表达效果好
缺点:
1. 免疫周期相对较长
2. 由于抗体的单域性,可能对小分子类抗原,如半抗原等不适用。 |