1.什么是CD25

功能性IL-2受体（IL-2R）由三个部分组成，即α链（IL2Rα，也称为CD25）、β链（IL1Rβ，也称为CD122）和γ链（IL2Rγ，也称为CD 132）。这三个亚基对IL-2R的功能和亲和力都是不可或缺的。静止的T细胞、B细胞和单核细胞很少表达CD25，CD25在Tregs中高水平表达，但在Teff细胞中不表达。消除或逆转Tregs的免疫抑制作用是肿瘤免疫治疗的关键。CD25是实现Treg耗竭的潜在靶点，它在肿瘤微环境（TME）和外周微环境中的作用受到了广泛的关注。

2.纳米抗体及其优势

已在骆驼科动物中鉴定出仅有重链抗体 (HcAb)。与常规 IgG 相比，这些抗体缺少 CH1 域，并且没有轻链。HcAb 的特异性仅依赖于称为 VHH 的重可变域。VHH 的重组生产会产生称为单域抗体 (sdAb) 或纳米抗体的片段。由于它们与人类 VH（家族 3）具有高度序列同一性，纳米抗体有望在人类治疗中表现出低免疫原性，并且易于人源化，欧洲药品管理局 (EMA) 批准了第一个治疗性纳米抗体 caplacizumab。纳米抗体的 CDR3 环通常比常规 VH 长，允许与非常规表位（如蛋白质裂隙）结合。此外，结构研究已经确定，纳米抗体通常具有更大的互补位多样性，涉及可变环和框架区内的氨基酸。纳米抗体还具有良好的溶解性和对 pH 值和温度的稳定性。

纳米抗体还可用于设计具有多种价态或特异性的较大分子，并且可以轻松地与显像剂或药物递送系统结合。

3.CD25信号通路及在肿瘤中的表达

当IL-2特异性结合于IL2Rα细胞外，促进IL2Rβ和IL2Rγ的异二聚化。IL-2发生轻微的结构变化，从而促进IL2Rα/β/γ和IL-2四聚体的形成，并触发JAK/STAT5、PI3K/Akt/mTOR和MAPK信号通路，这三种信号通路在细胞的生长、存活、分化和免疫中起重要作用。

图1：四级IL-2-IL-2R复合物的晶体结构和IL-2R介导的信号通路

CD25是Tregs 的标志物，在大部分Tregs中有很高的表达。如果Teff/Treg细胞的比率高，Teff细胞的过度激活或Treg细胞的过度减少将导致自身免疫性疾病。相反，如果Teff/Treg细胞的比例较低，抗肿瘤免疫就会降低。CD25在大多数实体瘤中以低水平表达。然而，它在Treg细胞中高水平表达，Treg细胞通常浸润到实体瘤中。

图2：Treg和肿瘤的关系

4.纳米抗体作为细胞因子递送的载体

IL-2 是一种参与免疫细胞活化和增殖的细胞因子，是早在 1992 年就批准用于癌症的第一种免疫疗法。然而，虽然细胞因子具有很强的抗肿瘤效力，但主要限制是脱靶激活和相关毒性。规避这种限制的主要策略是基因转移以在局部产生细胞因子，或抗体导向的细胞因子（免疫细胞因子）。IL-2-纳米抗体和 IFN-γ-纳米抗体都与抗 TAA 抗体协同作用以抑制肿瘤生长。免疫浸润分析显示 CD8+计数增加，但 IL-2 构建体也显示 Tregs 增殖。