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小鼠重组单克隆抗体制备

 

 

 

卡梅德生物能够为客户提供两种方式的鼠单克隆抗体制备服务,一种是利用噬菌体抗体展示技术制备重组单克隆抗体;另一种是利用细胞融合技术制备小鼠杂交瘤细胞系。我们的服务包括从抗原设计,合成与修饰,动物免疫,噬菌体文库构建与筛选到下游抗体修饰与应用鉴定。

重组抗体制备服务 — 鼠单克隆抗体制备

在噬菌体技术制备重组单抗过程中,我们通过将鼠源抗体可变区(Vλ, Vk, and VH)克隆进带有M13噬菌体pIII融合蛋白的噬粒系统,随后将筛选到的高特异性和高亲和力的兔源抗体可变区(Vλ, Vk, and VH)克隆进带有小鼠抗体骨架蛋白的质粒载体,联合我们的蛋白重组表达平台进行瞬时表达(产量可达~5g/L)。

鼠单抗制备服务流程如下图:

项目流程: 

 

步骤

服务内容

交付材料

周期

半抗原改造

/

改造后的小分子衍生物LC-MS的鉴定结果

1-2周

完全抗原制备

卵清蛋白

完全抗原SDS-PAGEUVMALDI-TOF鉴定结果

1-2周

钥孔蓝蛋白

人血清白蛋白

-γ球蛋白

噬菌体抗体库的制备

抗原乳化,免疫2-3只小鼠2至3次

PCR结果,免疫检测结果(含ELISA的效价和特异性检测结果),实验记录

1-2个月

收集脾细胞(或者外周血淋巴细胞),可变区基因分离

噬粒构建,转染表达,文库构建

抗体筛选,再克隆,抗体表达

腹水制备,抗体纯化