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Pull Down实验服务

卡梅德生物拥有丰富的重组标签蛋白表达经验,我们能够在原核和真核表达系统为客户表达带有GST,Myc-tag, Flag-tag, HA-tag等标签的重组蛋白。同时,我们的免疫共沉淀以及Pull Down技术来源于日本京都大学IPS实验室,保证了专业和准确性。

 

Pull down实验同样属于免疫共沉淀技术之一,该技术不同于免疫共沉淀技术之处在于其利用蛋白与蛋白,蛋白与其他生物分子之间的相互作用进行目标分子的捕捉和研究。我司实验室已经建立并完善了GST融合蛋白pulldown技术和链霉素标记pulldown技术,这两种技术分别用于蛋白与核酸(RNA/DNA)的研究。

 

免疫学检测服务 — GST pulldown实验

该技术首先利用重组表达技术表达带有GST(谷胱甘肽转移酶)标签的“鱼饵”蛋白,再利用该鱼饵蛋白和细胞裂解液进行孵育,捕获能够与鱼饵蛋白结合的靶分子,然后加入带有谷胱甘肽(GSH)标记的琼脂糖珠子,GSH在GST的催化作用下将蛋白复合物链接到琼脂糖珠子上,低速离心收集上述复合物从而进行后续SDS-PAGE等分析。

 

GST pulldown实验流程:

 

免疫学检测服务 — RNA/DNA pulldown实验:

RNA/DNA Pull down类似于GST pulldown技术,该技术利用生物素标记RNA/DNA 探针,与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA/DNA—蛋白质复合物。再利用链亲和素标记的磁珠或琼脂糖珠,将上述复合物从细胞裂解中分离开来。然后进行洗脱,SDS-PAGE或银染等验证靶标分子。

 

RNA/DNA pulldown实验流程:

交付结果:

*pulldown产物,SDS照片(SDS条带可选)

*SDS-PAGE结果和Western Blot结果

*蛋白质鉴定结果(质谱结果)(可选)

*融合质粒

*详细的实验报告