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免疫共沉淀-Co-IP 实验

卡梅德生物(KMDTM Bioscience)多年致力于蛋白相互作用研究,蛋白质相互作用能够揭示分子之间的相互作用模式,有效揭示体内信号途径转导过程,对调控细胞及其信号具有重要意义。我们的科研专家积累了多年的蛋白互作研究与检测经验,凭借成熟技术能够快速完成实验内容,为客户节省宝贵的时间和经费。此外,我们也拥有丰富的重组标签蛋白表达经验,能够在原核和真核表达系统为客户表达带有GST,Myc-tag, Flag-tag, HA-tag等标签的重组蛋白。卡梅德生物建立了成熟的蛋白表达平台,拥有齐全的蛋白检测设备及技术,我们的免疫共沉淀以及Pull Down技术来源于日本京都大学IPS实验室,能够确保每一个实验步骤精细控制,保证检测结果准确、客观、可信。卡梅德生物坚持为客户提供高品质的服务内容,能够提供从重组蛋白制备到蛋白表达及纯化,蛋白互作研究等一站式技术服务,个性化定制服务满足不同客户的实验需求。

免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)技术是以抗体和抗原之间的特异性免疫反应为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。该技术是利用抗体与抗原之间特异性结合,抗体能够特异性的识别并结合样品中的抗原,再利用琼脂糖交联的protein A/G特异性结合抗体,从而使抗原抗体复合物沉淀下来。经过洗脱,凝胶电泳分离,结合Western Blot 等技术定量或定性的分析样品中特定抗原的含量情况。免疫共沉淀能够验证两种蛋白质在细胞内的天然结合,符合体内实际情况,检测结果可信度高。

免疫共沉淀实验操作步骤较多,但每一步实验步骤都十分关键,要想达到最终的实验目的,不仅需要高质量的抗体,对免疫沉淀体系也需要严格的控制指标。卡梅德生物能够为客户提供高品质的免疫共沉淀技术服务。我们的科研人员严格控制实验流程中的每个关键步骤的质量,保证客户能够得到理想的实验结果。

图1 免疫共沉淀技术原理

 

项目

免疫共沉淀-Co-IP实验

实验原理

该技术实验原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化在琼脂糖凝珠(argarose beads)上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白,那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过Western blotLC-MS/MSB蛋白进行检测,进而证明两者间的相互作用。

应用

·常用于验证两种已知蛋白的相互作用

·寻找细胞内是否存在与已知蛋白相互作用的未知蛋白

优点

·相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态

·蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响

·可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物

 

免疫共沉淀技术主要实验流程:

  

我们的服务优势:

 

--经验丰富的实验操作水平,科学的对照组设置,使用高品质的试剂盒进行实验,protein A磁珠吸附效高,保证实验成功率高;

--使用银染技术,灵敏度更高,SDS-PAGE电泳结果更加清晰,实验结果更加精确可靠;

--拥有完整配套检测设备,完备的质谱、色谱系统,可对结果进一步进行分析;

--完整的信息分析,提供详细的实验报告,提供共沉淀产物, SDS-PAGE结果和Western Blot结果,可提供蛋白质鉴定结果(质谱结果);

--具有成熟的蛋白平台,抗体制备等平台,能够提供真正的一站式服务体验,节省客户宝贵时间

  

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