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抗体亲和力成熟服务

卡梅德生物(KMDTM Bioscience)多年来致力于抗体领域研究。亲和力是抗体药物的一个关键参数,通常会影响抗体的功能和药效。经过人源化改造后的抗体亲和力一般会下降,因此,恢复人源化抗体的亲和力或提高到更高的水平是必要的步骤,亲和力成熟技术是用于提高抗体与抗原亲和力的常用技术。

卡梅德生物能为客户提供基于自有噬菌体抗体文库技术制备的多物种抗体亲和力成熟服务。我们拥有技能娴熟的抗体团队,在抗体亲和力成熟方面积累了丰富的经验,能够将客户提供单克隆抗体亲和力提高2到3个数量级,达到10-9 M级别。基于噬菌体展示技术,卡梅德生物着力于提供一站式科研服务,包括噬菌体抗体库构建和筛选、抗体人源化改造人源Fab抗体文库构建人源scFV抗体库构建磷酸化抗体定制等多种技术服务,可为客户定制合适的实验方案。

 

噬菌体抗体文库技术抗体亲和力成熟服务:

 

亲和力成熟是指机体在遇到外源物质时,淋巴B 细胞发生抗体基因重排,同时伴随超变区CDR的高频突变以形成能分泌不同亲和力抗体的淋巴B细胞。随后低亲和力的B 细胞死亡,高特异性与高亲和力的B淋巴细胞存活并识别外源物种。

卡梅德生物利用噬菌体展示抗体文库技术,结合错误倾向性PCR以及定点突变技术,能够模拟这种生物体细胞超频突变。卡梅德生物的技术优势在于能够进行体外快速突变,建立超过具有1010独立克隆的抗体噬菌体展示文库,从而在短时间内可以获得抗原高特异性和高亲和力的抗体。

 

技术流程:

  

 

 

常用的抗体体外亲和力成熟技术:

 

在体外抗体亲和力成熟过程中,选择突变区域以及如何引入突变是一个关键问题,目前的突变策略主要分为三大类,分别为:随机突变、置换和定向突变、易错PCR。

 

类型

特点

易错PCR

是目前常用的抗体突变技术,可以在抗体基因的全长或部分区域随机引入突变。在聚合酶对目的基因扩增时,通过应用错配率高的聚合酶或调整反应条件等,以一定的频率向目的基因中随机引入突变,并通过多轮PCR反复进行随机诱变,累计突变效应,最终获得目的蛋白的随机突变体。

链置换

链置换是保留某个特定抗体的重链或轻链,另一条链与一个随机化的互补链进行组合,经过噬菌体抗体库筛选从中筛选更高活性的突变株。

定点突变

体细胞高频突变发生区域主要集中在与抗原直接接触的CDR区。在抗体的亲和力体外成熟过程中,CDR区是常选用的定点突变区域,对CDR进行定点突变时,可以对多个CDR进行平行突变或进行逐步优化

DNA改组

DNA改组技术是对同源的抗体基因,采用脱氧核糖核酸酶I将其切割成不超过50bp的片段,再随机组合后进行PCR扩增成完成的抗体基因的技术。

 

交付结果:

 

交付内容

经亲和力优化的抗体序列

高亲和力的纯化抗体

完善的实验报告和数据:包括SDS-PAGE及亲和力分析等结果

 

我们的服务优势:

 

--提供多种方法保证亲和力成熟项目的成功率;

--技术娴熟的技术人员,拥有丰富的成功经验;

--专业的抗体数据库分析系统;

--成熟的随机突变、定点突变技术;

--搭建了快速、高通量的抗体表达与筛选技术平台;

--提高抗体亲和力,优化与不同种属的抗原的交叉结合能力;

--完整的上下游服务:提供从抗体制备、抗体测序,抗体标记修饰,到抗体人源化等一站式技术服务,节约客户宝贵时间和经费

 

如何订购?

 

如果您对我们的服务项目感兴趣,请直接拨打热线电话:+86-022-8216-4980/156-0119-0182或发送邮件至info@kmdbioscience.com