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蛋白质标记服务

卡梅德生物多年致力于重组蛋白表达和抗体制备研究。我们的科学家能够为您提供多种方式的蛋白修饰服务,包括酶标记,荧光标记,同位素标记,PEG修饰,生物素Biotin,磁珠偶联和量子点标记等服务。

 

--蛋白酶标记服务

蛋白标记服务中的酶标记物通常是指辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷脂酶(AP标记),这两种标记物常被用于标记抗体后用作酶联免疫吸附实验(ELISA检测)。HRP由多个同功酶组成,分子量为40,000,等电点为PH3~9,酶催化的最适PH因供氢体不同而稍有差异,但多在PH5左右。HRP比较适用于快速显色反应,ELISA检测中加入底物可以5-10分钟内即可到达OD450值1.8-2.5左右;AP标记物比较适用于慢速显色反应,显色时间约4-8个小时,催化形成的黄色化合物比较稳定,非常适合酶促动力学的定量检测。卡梅德生物采用的HRP和AP均来自sigma公司,并且根据丰富的蛋白定量经验,能够采用合理的方案将蛋白与酶的标记比例接近1:1,以获得最优的蛋白标记效果。 此外,我们也为广大科研人员提供生物素标记服务。生物素(Biotin)既可以作为融合标签与目的蛋白进行重组表达,以便后续纯化和筛选工作,如进行噬菌体文库筛选时,生物素(Biotin)标记具有很高的筛选效率,同时也非常适用于IHC的组织特异性表达监测;蛋白进行生物素(Biotin)标记后,可以直接应用于IP,磁珠分选。

 

---蛋白同位素标记服务

蛋白同位素标记是非常经典的一种蛋白示踪和蛋白组学定量技术,与体外标记技术相比,同位素标记技术属于体内标记,用天然同位素(轻型)或稳定同位素 (重型)标记的必需氨基酸取代细胞培养基中相应氨基酸,细胞经5-6个倍增周期后,稳定同位素标记的氨基酸完全掺入到细胞新合成的蛋白质中替代了原有氨基 酸。不同标记细胞的裂解蛋白按细胞数或蛋白量等比例混合,经分离、纯化后进行质谱鉴定,根据一级质谱图中两个同位素型肽段的面积比较进行相对定量。卡梅德生物自有蛋白表达平台结合我们的细胞培养平台,能够为客户提供13C,15N,15N-13C,35S和3H的蛋白同位素标记服务。 蛋白同位素标记服务也可以使用125I和131I,蛋白中的酪氨酸可通过 HPLC 或开管柱色谱(取决于碘化分子的特性)进行标记,并去除其中的游离碘,将放射性碘 高效标记到蛋白和其他分子上,放射性碘用作示踪剂或探针。通常,使用 TLC 法检测标记产物,以保证游离碘的百分比 <5%。

 

---蛋白荧光标记服务

荧光染料标记蛋白/多肽技术是非常常见的蛋白体外标记技术,除了GFP,GYP等融合表达荧光蛋白之外,目标蛋白经过荧光染料标记可以直接进行活体示踪,细胞分选等。卡梅德生物技术能够提供的荧光染料标记服务包括FITC、FAM、RBITC、胶体金标记Co-Au、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、APC、PE、Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 594、Alexa Fluor 647等。对于每一个需要标记的多肽或蛋白,我们技术人员会严格评估多肽或蛋白的物化性质,如多肽标记,linker长度,类型交联位置。

 

---蛋白量子点标记服务

我们提供以无机结构ZnCdSe/ZnS为核心的量子点标记技术服务:

羧基和氨基水溶性量子点(图A):使用聚合物对油溶性量子点的表面修饰而得到,可以均匀的分散于水溶液中(如硼酸盐缓冲、PBS缓冲溶液等),表面羧基和氨基具有反应活性,粒径范围12~18nm。

油溶性量子点(图B):通过疏水配体对无机结构ZnCdSe/ZnS表面的包覆,量子点可以均匀的分散于非极性有机溶剂中(如己烷、甲苯、氯仿等),使其更容易进行加工。粒径范围5 ~10 nm,油溶性量子点通过封装后可以作为LED背光光源,增强显示色域;另外,对油溶性量子点进行表面修饰引入活性基团后,可以与生物分子进行偶联,应用于生物标记/检测、高通量编码、活体成像及动态示踪等领域。

 

---蛋白磁珠标记服务

磁性纳米球(MNS)是以高分子聚合物为核,表面包覆有磁性纳米粒子、带有功能基团(羧基、氨基)的纳米球系列产品。该系列产品具有分散性好、磁响应快、表面功能基团丰富、偶联容易、分离简单等特点,可广泛应用于核酸纯化、蛋白纯化、亲和层析、细胞分选、免疫分析和临床诊断等多个生物医学领域。

 

---蛋白PEG标记服务

卡梅德生物提供不同分子量的PEG标记服务,具体详情请见蛋白PEG修饰服务