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重组蛋白哺乳动物表达服务

卡梅德生物(KMDTM Bioscience)多年致力于重组蛋白表达与制备研究。我们的科学家拥有丰富的蛋白哺乳动物重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户制定独具特色的蛋白哺乳细胞表达策略。

卡梅德生物(KMDTM Bioscience)拥有常规的哺乳动物表达体系,包括FreeStyle™ 293-F cell line (Thermo Fisher)Expi CHO-S (Thermo Fisher)等细胞系,配合我们自主设计的表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供高达1g/L表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。

哺乳动物蛋白表达系统适用于科学家对天然构象蛋白的体外重组表达需求,如完全的糖基化修饰,磷酸化修饰等;利用哺乳动物蛋白表达系统,经过高密度发酵技术培养,卡梅德生物的科学家可以做到高达6.3g/L表达水平的重组抗体发酵,适合于重组单抗药物的高水平表达发酵。我们的细胞发酵培养人员均经过严格的GMP体系培训和质量控制体系培训,可为客户提供可追溯的蛋白表达与制备文件记录。

卡梅德生物可为客户提供严格按照GMP,包括细胞种子库来源文件记录体系、细胞种子批检定,动物源成分的质控,标准化细胞培养与转化操作流程,全套GE提供的纯化填料和设备等准则进行生产的重组蛋白。我们的规模化发酵,除了使用发酵罐外,对于3-10L的贴壁哺乳动物细胞发酵规模,我们可以直接利用一次性细胞发酵工厂进行细胞发酵,蛋白表达制备(需要客户提供慢病毒或腺病毒等),该技术平台发酵与转化一次性完成,周期大大缩短。

 

服务流程图

 

服务内容与步骤

 

步骤

具体服务内容

周期

基因克隆及载体构建

*扩增/鉴定基因片段或合成目的基因,插入哺乳动物细胞表达质粒

*PCR及测序检测确定亚克隆基因

交付:测序数据和实验方案

1-2

瞬时蛋白表达

*重组质粒转染细胞(293F, CHO):瞬时表达

*SDS-PAGEWB检测

交付:表达结果和实验报告,0.02-2 mg蛋白,纯度>85%

34

稳定表达(可选)

重组蛋白CHO293F稳定表达细胞系构建和筛选。

交付:稳定细胞系,构建报告;0.02-2 mg重组蛋白。

46

小规模蛋白表达

*少量表达及表达条件优化:1L的小规模蛋白表达。

交付:优化报告,培养条件和1-5mg重组蛋白。

34

大规模蛋白制备及纯化

* 30L80L130L250L发酵罐,以及多种规格细胞工厂(40*N)。

*通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

交付:重组蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白。

58

特殊蛋白表达

*客户提供指定细胞系,卡梅德生物复苏与放大培养。

*定制化微载体悬浮培养技术,适用于贴壁细胞的高密度细胞发酵培养与蛋白表达(细胞数:107/ml)。

*细胞工厂化培养

协商

 

我们的服务优势

 

--密码子优化:包含稀有密码子分析,蛋白亲水性分析和跨膜结构域的预测分析

--多种融合标签载体和宿主,以保证高可溶蛋白表达和高蛋白活性

--高活性表达:实现复杂的糖基化修饰和磷酸化修饰,具有完整的空间结构特征

--多重表达模式:稳定表达和瞬时表达

--低内毒素水品:LAL检测法<0.1EU/ug

--多种规模蛋白发酵模式:小规模(500ml2.5L10L)、大规模(30L,80L,130L250L发酵罐)

--完整的GMP文件支撑体系,保证您的产品所有材料、试剂和制备信息可追溯

 

如何订购?

如果您对我们的服务项目感兴趣,请直接拨打热线电话:+86-022-8216-4980/156-0119-0182或发送邮件至info@kmdbioscience.com