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cDNA文库构建服务

cDNA文库是以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同,所以cDNA文库具有组织细胞特异性。


分子生物学服务 — cDNA文库构建

卡梅德生物提供基于SMART方法的cDNA文库(cDNA Library)构建服务,使用的载体为pDNR-LIB。在连接、克隆cDNA片段时,进行了cDNA片段的长度筛选,基本上去除了400 bp以下的cDNA短片段,保证了较长cDNA片段的克隆效率。cDNA文库构建基本流程如图所示:

 

卡梅德生物的cDNA文库建立标准:库容≥1.0×106,普通样品平均插入片段长度≥1.0 kb


客户须知:请您尽量提供新鲜的材料以及足够多的样品量,防止mRNA提取质量不高。具体要求如下:

*动物组织材料,样品质量需大于5g

*植物样品标本,样品质量需大于20g

*培养细胞,请提供5×107个以上细胞

*直接提供Total RNA(需保证RNA没有降解,需要通过电泳等方法进行判断),纯度要求A260/A280≥1.8,样品总量需大于500ug。

 

交付结果: 

*cDNA与载体的连接产物50μl

*连接产物转染菌种1ml(可选)

*详细实验流程报告以及图片结果