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IOS沉默(RNAi)稳转细胞系构建服务

卡梅德生物(KMDTM Bioscience)多年来致力于稳定细胞株构建服务研究。高质量的稳定细胞系广泛应用于信号传导,药物靶点研究,免疫治疗药物开发等多种研究领域。卡梅德生物在稳定细胞株构建方面积累了丰富的经验,已在多个种属细胞中成功构建过表达和RNAi稳转细胞株。我们的细胞技术人员精准把控实验环节中的每一步操作,辅以严格的流程管理体系,让复杂、重复性要求高的实验更有保障。卡梅德生物建立了完善的细胞生物学技术平台和标准先进的细胞实验室,拥有品种齐全的细胞库资源,涵盖超过300多种的肿瘤细胞和原代细胞,外源基因表达鉴定严格,检测方法多样, q-PCR, ELISA, Western blot等各种技术可供选择,我们坚持为客户提供高质量的基因过表达、沉默稳转细胞系构建等多种服务。卡梅德生物依托先进的技术和科研团队,可根据您的实验目的,量身设计切实可行的实验方案,构建高品质稳定细胞系。

目的基因沉默是研究基因功能常用的手段之一。基于卡梅德生物的IOS(Integration Operating System)重组技术,我们可为您提供目的基因的沉默稳定株系构建服务。利用IOS技术,将目的shRNA靶点定点整合到经过筛选验证过的基因组高表达活性位点中,这些位点不仅安全(无基因),而且基因表达量更高(活跃表达位点),因此可以实现shRNA的高活性转录表达,进而对目的基因造成干扰,达到目的基因沉默的目的,并能长期稳定遗传,构建稳定细胞株系,同时缩短了实验周期,节省客户宝贵时间。除此之外,我们也可以提供瞬时表达服务,构建瞬转株系。

 

技术原理:

 

项目

IOS沉默(RNAi)稳转细胞系构建服务

实验原理

稳转细胞系技术原理:用转染质粒或病毒感染的方法将构建好的含外源DNA的载体导入细胞,根据不同的基因载体中所含的抗性标志选用相应的药物进行选择性筛选,得到稳定沉默特定基因表达的细胞系。

优点

采用IOS 技术具有以下优势:

·shRNA 为定点整合,非随机整合

·shRNA 为稳定遗传,传代过程中,不会丢失基因大小不影响整合的效率

·保证细胞传代过程中,基因的沉默效率保持一致,方便进行科学研究

 

在基因功能的研究中,目的基因是否有效导入靶细胞,是功能研究的前提条件之一。根据不同的实验需求可以选择瞬时转染/感染和稳转细胞株构建。两者的特点分别为:

 

服务

特点

瞬时转染/感染

·外源DNA不整合到宿主的染色体中,一个宿主细胞中可以存在多个拷贝数,产生短时间内的高水平的表达

·外源基因的表达水平不存在整合位点的问题,不会受到周围染色体元件影响

·瞬时转染所需的人力和时间比稳转少,但DNA摄入效率和表达水平在不同实验中差异较大,表达不长久也不稳定

稳转细胞株

·外源基因进入受体细胞并整合到细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因

·稳定表达细胞株弥补了瞬时感染(或转染)实验中外源基因表达时间短的缺陷,便于长期观察

·稳转细胞的筛选需根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物

 

项目流程:

我们的服务优势:

 

--成熟稳定的细胞平台:拥有品种齐全的细胞库资源,多种不同启动子和标签的表达载体可供选择,还可以选择多种报告基因和亲和标签;

--可同时抑制多个基因的表达;

--利用IOS技术,可以快速将 shRNA 整合到细胞的基因组中,实现目的基因的稳定沉默,缩短实验周期;

--设施齐全,拥有标准细胞实验室,实验体系成熟,配备齐全的实验仪器;

--经验丰富的实验技术人员,精湛的操作水平,较好的电转成功率,能够转染大多数细胞,表达效率高;

--细胞来源清晰可追溯,质量有保证:无细菌、真菌和支原体污染;

--具备完善的细胞、抗体、蛋白等服务平台,能够提供从稳定细胞系构建到重组蛋白生产等一站式技术服务

 

如何订购?

 

如果您对我们的服务项目感兴趣,请直接拨打热线电话:+86-022-8216-4980/156-0119-0182或发送邮件到info@kmdbioscience.com